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全人抗體或者人源化抗體,由于較低的免疫原性,是抗體的優選類型。利用抗體庫技術獲得的全人或者人源化抗體,已有7個被批準上市,近60個進入臨床試驗階段。Abl
ink構建了高質量的全合成人源化Fab抗體庫(Su®Humanized Fab Library)和全合成人源化scFv抗體庫(Su®Humanized scFv Library),正在構建全人scFv天然庫(Su®human scFv Library),幫助客戶快速篩選針對目的蛋白的全人抗體或者人源化抗體。
全合成人源化Fab抗體庫Su® Fully synthetic humanized Fab Library
制備步驟
1 選擇表達好、親和力高的抗體單克隆作為模板
2 基因全合成pelB-VL-CH1和pelB-VH-CH1的串聯DNA,克隆到Su®long phagemid上構建表達Fab的噬菌體
3 利用Su®Kunkel Mutagenesis Kits 對VL和VH 的CDR區域進行高通量突變,構建突變Fab DNA文庫
4 將DNA文庫電轉入超級感受態細胞SS320(含helper phage)中,構建突變Fab噬菌體庫亞庫
5 將多個亞庫混合形成全合成人源化Fab抗體庫(Su®Humanized Fab Library)
Su®Humanized Fab Library特點
1 通過噬菌體展示系統構建
2 以humanized 4D5為模板,在CDR L3、H1、H2和H3區域引入突變
3 CDR L3長度為8-12個氨基酸,CDR H3的長度為7-25個氨基酸
4 包含32個亞庫( sub-libraries),總庫容為3X1010
5 Fab-M13PIII(267-425)融合蛋白單體展示
6 建庫使用超級感受態細胞SS320(含helper phage);篩選使用Su®DH5aF'+M13K07 Helper phage
全合成人源化scFv抗體庫Su®Fully synthetic humanized scFv Library
使用Su®Kunkel Mutagenesis Kits 一步法將Su®Fully synthetic humanized Fab Library轉化為Su®Fully synthetic humanized scFv Library。
全合成人scFv抗體庫 Su®Fully synthetic human scFv Library
制備步驟
1 PCR擴增人抗體胚系基因DP47H和DPK22、DPL11,克隆到普通載體上
2 使用IUB code簡并引物PCR突變CDR區域,overlap PCR構建DP47H-linker-DPK22和DP47H-linker-DPL11 scFv,克隆到Su®short phagemid上,構建突變scFv DNA文庫
3 將DNA文庫電轉入感受態細胞TG1中,構建突變scFv噬菌體庫亞庫
4 將多個亞庫混合形成全合全合成人scFv抗體庫(Su®Fully synthetic human scFv Library)
Su®Fully synthetic human scFv Library 特點
1 通過噬菌體展示系統構建
2 以重鏈(DP47H)和輕鏈(DPK22、DPL11)作為模板,在CDR L3和H3區域引入突變
3 CDR L3長度為9-10個氨基酸,CDR H3的長度為8-10個氨基酸
4 包含6個亞庫( sub-libraries),總庫容為1X109
5 scFv-M13PIII融合蛋白單體展示
6 建庫和篩選使用TG1+ M13K07 Helper phage
詢價與訂購
郵箱:abl
ink_cd@hotmail.com
電話:028-83320992
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